Colesterol

En los seres humanos, del 60 al 70% del colesterol es transportado por lipoproteínas de baja densidad (LDL), del 20 al 35%, por lipoproteínas de alta densidad (HDL) y del 5 al 12%, por lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL)……

MÉTODO DE CARAWAY Y FANGER MODIFICADO

Se basa en la desproteinización en frío y la liberación del colesterol al suero con la mezcla ácido acético – anhídrido acético. Las proteínas se eliminan por centrifugación y al sobrenadante se le mezcla con ácido sulfúrico para efectuar la reacción de Lieberman – Burchard.

150 – 240 mg%

MÉTODO DE LIEBERMAN – BURCHARD

Se emplea una muestra de suero o plasma anticoagulado con EDTA o heparina, pero no con oxalato, citrato o fluoruro.  Para la toma de muestra se requiere ayuno mayor o igual a 12 horas

*MÉTODO ENZIMÁTICO

El colesterol es oxidado enzimáticamente por la colesterol oxidasa (CHOD) previa hidrólisis de los ésteres mediante una lipasa de origen fungal. El H2O2 generado en la oxidación produce la copulación oxidativa del fenol con la 4 – aminofenazona mediante una reacción catalizada por la peroxidasa (POD). El producto es una quinonimina roja con absorbancia máxima a 505 nm.

  • Hombres: 1,72  –  2,48 g/L.
  • Mujeres:1,75  –  2,40 g/L

Glucosa

MÉTODO DE LA ORTO – TOLUIDINA.-  El grupo aldehído de la glucosa reacciona con la amina aromática de la orto – toluidina en solución ácida (ác. acético glacial) en presencia de calor para formar una mezcla de glucosilamina y su correspondiente base de Schiff (producto coloreado). 70 – 110 mg% *MÉTODO DE FOLIN – WU.- El sulfato de cobre en solución alcalina forma óxido cuproso tratado con el reactivo fosfomolíbdico de color azul, en una intensidad que depende de la concentración de glucosa presente. 80 – 120 mg% *MÉTODO ENZIMÁTICO.- La glucosa es oxidada enzimáticamente por la glucosa oxidasa (GOD) a ác. glucónico y H2O2; el agua oxigenada en presencia de peroxidasa (POD) produce la unión oxidativa del fenol con la 4–aminofenazona (4 – AF) dando lugar a un cromógeno rojo cereza con absorbancia máxima a 505 nm.

  • Suero o plasma  :0,70 – 1,10 g/L.
  • Sangre total: 0,60 – 1,00 g/L.
  • L.C.R.:  0,40 – 0,74 g/L

Urea

*Método enzimático específico (análisis cuantitativo).-La urea se descompone por acción de la ureasa produciendo dióxido de carbono y amoniaco; éste reacciona con fenol e hipoclorito en medio alcalino produciendo azul de indofenol que se determina colorimétricamente. 0,20 – 0,45  g/L.  (en individuos de 20 a 45 años

Ácido úrico

-*MÉTODO COLORIMÉTRICO (DETERMINACIÓN CUANTITATIVA).-El ácido úrico de la muestra, previa desproteinización con ácido túngstico preformado, reacciona en medio alcalino de carbonato de sodio con el reactivo fosfo-litio-túngstico produciendo un color azul que es proporcional a la concentración de ácido úrico de la muestra.

  • Hombres      :   35  –  70 mg/L.
  • Mujeres       :   25  –  60  mg/L

Creatinina

*MÉTODO COLORIMÉTRICO PARA LA DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE CREATININA.-En un medio alcalino que contiene picrato, la creatinina presente en la muestra reacciona con éste formando un complejo rojizo, cuya mayor absorción se da a 530 nm… 0,6  –  1,4  mg/dL. *MÉTODO DEL PICRATO ALCALINO.-La creatinina en solución alcalina  reacciona con el picrato para formar un compuesto rojo anaranjado (Reacción de Jaffé).

Hombres:   0,7  –  1,2  mg/dL. Mujeres:     0,5  –  1,0  mg/dL

Lípidos totales

.-Los lípidos contenidos en el suero, al ser calentados con ác. sulfúrico son oxidados a cetonas, que al reaccionar con el reactivo de fosfovainillina producen un color rosado de intensidad proporcional a la cantidad de lípidos presentes. 400 – 1,000 mg/dL.*Método Colorimétrico para la determinación de Triglicéridos en Suero.-Los triglicéridos son hidrolizados enzimáticamente por una lipasa específica produciendo glicerol y ácidos grasos. El glicerol se oxida con ácido periódico a formaldehído que se cuantifica colorimétricamente a 410 nm.- Hasta 30 años: 0,10  a  1,40 g/L.     – De 30 a 40 años: 0,10  a  1,50 g/L.- De 40 a 50 años: 0,10  a  1,60 g/L.*Método de Soloni Modificado.-Los triglicéridos son extraídos del suero por partición entre nonano y agua/isopropanolol/acido sulfúrico, luego hidrolizados con calor en medio alcalino, liberándose glicerol, el cual por acción del ácido periódico es oxidado a formol, que al reaccionar con amonio y la acetilacetona resulta en un compuesto de color amarillo de intensidad proporcional a cantidad de triglicéridos presentes en la muestra…46  –  145 mg/dL.****MÉTODO COLORIMÉTRICO PARA LA DETERMINACIÓN DE BILIRRUBINA EN SUERO.-La bilirrubina reacciona específicamente con el ác. sulfanílico diazotado produciéndose un pigmento de color rojo violáceo. La bilirrubina no conjugada requiere de un desarrollador acuoso  que posibilite su reacción; de forma tal que para que reaccione la bilirrubina total presente en la muestra debe agregarse benzoato de cafeína al medio de reacción.*MÉTODO COLORIMÉTRICO SEGÚN REITMAN Y FRANKER PARA DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE GOT Y GPT.Se   produce   la   transferencia  de  grupos  NH2  de  un aminoácido a un cetoácido.*GOT   :   4  a  20  U/L. * GPT  :  2 a 18 U/L.***PROTEINAS  :*MÉTODO COLORIMÉTRICO PARA LA DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES SEN SUEROLos enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión cúprico, en medio alcalino, para dar un complejo color violeta con máximo de absorción a 540 nm., cuya intensidad es proporcional a la concentración de proteínas totales presentes en el suero. 6,1  –  7,9  g/dL.*MÉTODO DE BIURET.-Las proteínas totales dan un color violeta al reaccionar con disolución alcalina de tartrato de cobre. La cantidad absoluta de proteína de la muestra es calculada a partir de la medida de absorbancia (540 nm.).6  –  8  g/dL.***MÉTODO COLORIMÉTRICO PARA LA DETERMINACIÓN DE FOSFATASA ÁCIDA TOTAL Y PROSTÁTICA EN SUERO: La  muestra  se  pone  en  contacto  con  el  sustrato  p-nitrofenilfosfato tamponado a pH 4,8; que al disociarse por acción de la fosfatasa ácida produce p-nitrofenol y ácido fosfórico. El p-nitrofenol liberado se convierte en un compuesto amarillo que se mide espectrofotométricamente y cuya concentración es proporcional a la cantidad de enzima presente en la muestra. En un ensayo paralelo se inhibe la fracción prostática con L-Tartrato y por diferencia entre la fosfatasa ácida total (FAT) y la fosfatasa ácida no prostática (FANP) se calcula la actividad de fosfatasa ácida prostática (FAcP).Fosfatasa Acida Total     :   2,5 – 11 U/L.Fosfatasa Acida Prostática :   hasta 3,5 U/L.