Componentes del Microscopio y Equipamiento

Microscopio: Brazo (Arm), condensador (condenser), fuente de luz (light source), ocular (eyepiece), revólver (revolving), tornillo macrométrico (coarse adjustment knob), tornillo micrométrico (fine adjustment knob), potenciómetro (potentiometer), platina (stage), objetivo (objectives), pinzas (tweezers), cabezal (head), iris (condenser aperture level).

Autoclave: Tapa (lid), manómetro (manometer), salida de vapor (steam outlet), salida de agua (water outlet), nivel del agua (water level), resistencia (resistance), presión (pressure), agua (water), interruptor (switch), panel de indicación (indication panel), pantalla de temperatura (temperature display).

Limpieza y Tratamiento de Portaobjetos

  • Tratamiento suave: Sumergir en etanol, acetona o mezcla etanol-éter durante 15 minutos. Secar al aire en lugar libre de polvo.
  • Tratamiento medio (grado 1): Lavar con agua y jabón, aclarar 3 veces, sumergir en etanol/acetona/etanol-éter (15 min), enjuagar en agua destilada 3 veces y secar.
  • Tratamiento medio (grado 2): Lavar con agua y jabón, aclarar 3 veces, sumergir en etanol/acetona/etanol-éter o ácido acético (15 min), enjuagar en agua destilada 10 veces, ajustar pH a 6-7, secar en estufa a 60 ºC toda la noche.
  • Tratamiento agresivo (mezcla sulfo-crómica): Sumergir 24 horas en mezcla (1 parte dicromato potásico, 2 partes ácido sulfúrico, 7 partes agua destilada), enjuagar y secar.

Uso y Mantenimiento del Microscopio

Estado en reposo

  1. Objetivo de 4x.
  2. Platina en la posición más baja.
  3. Intensidad de luz mínima y diafragma cerrado.
  4. Apagar el equipo.
  5. Limpiar el objetivo de inmersión (100x) con papel adecuado o alcohol-éter al 50%.

Normas de uso

  1. Ubicar en la mesa y quitar la funda.
  2. Conectar a la red eléctrica y ajustar la altura del asiento.
  3. Encender la luz a intensidad media.
  4. Colocar el objetivo de menor aumento (4x) y bajar la platina.
  5. Colocar el portaobjetos, sujetar con pinzas y centrar la muestra.
  6. Ajustar oculares y distancia interpupilar.
  7. Enfocar con el tornillo macrométrico (mirando lateralmente) y afinar con el micrométrico.

Prácticas Microbiológicas

Observación de agua estancada

Se toma la muestra del fondo con pipeta Pasteur. Colocar con cubreobjetos a 45º para evitar burbujas. Observar de 4x a 40x. No usar inmersión en aceite.

Tinción Simple y de Gram

Tras preparar el frotis y fijar con calor (2-5 pasadas por el mechero), se procede a la tinción. En la Tinción de Gram, los pasos incluyen: cristal violeta (1 min), lugol (1 min), decoloración con alcohol-acetona (15-20 seg) y contraste con safranina (5 min).

Estudio Microbiológico de Superficies

Se utilizan hisopos humedecidos para recoger muestras (pomos, suelas, fosas nasales) y se inoculan en medios como Manitol Sal, Sabouraud o Agar. Incubar a 37 ºC durante 12-24 horas.

Preparación de Medios y Autoclavado

Disolver el medio en agua destilada, agitar sin hervir y ajustar pH (7,3-7,4). Esterilizar en autoclave. Puntos críticos del autoclave: Asegurar nivel de agua, cerrar válvulas correctamente y no abrir hasta que la presión sea 0.